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ISRE-Luc/Raw264.7

CBP74098

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I. Background
      干扰素(IFN)是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的具有多种功能的可溶性糖蛋白,是先天和适应性免疫的关键效应分子。IFN 细胞因子根据其结合的不同干扰素受体分为三种类型:I 型、II 型和 III 型。Ⅰ型干扰素的分类较多,包括 IFN-α、IFN-β、IFN-δ、IFN-κ、IFN-ω、IFN-τ、IFN-ε、IFN-ξ 等;Ⅱ型干扰素为 IFN-γ;Ⅲ型干扰素即 IFN-λ,包括IFN-λ1、IFN-λ2 及 IFN-λ3。Ⅰ型干扰素主要功能是抗病毒及抗肿瘤,Ⅱ型干扰素主要功能是诱导主要组织相容性复合体(MHC)类抗原的表达和免疫调节效应,但其抗病毒作用比Ⅰ型干扰素弱。Ⅲ型 INF 为 2003 年发现的一种新型干扰素,具有广谱的抗病毒及免疫调节活性。
 
      配体结合后,I 型和 II 型受体均被激活,导致受体亚基二聚化和重排,从而通过自身磷酸化激活相关 JAK,并进一步激活 STAT 蛋白。磷酸化后,激活的 STAT 形成同型二聚体,然后转位到细胞核中,在那里启动 IFN 刺激基因的转录。
 
      I 型干扰素还可诱导 ISGF3 复合物的形成,该复合物由 STAT1、STAT2 和 IRF9 组成。ISGF3 复合物与 ISRE(干扰素刺激反应元件)结合,进一步诱导启动子内含有 ISRE 的干扰素刺激基因的转录。
IFNγ 与 IFNγ 受体结合导致下游 STAT1 在 Tyr701 位点发生酪氨酸磷酸化。产生磷酸化的 STAT1 同型二聚体转位至细胞核并与 GAS(IFNγ 激活位点)元件结合,从而诱导 IFNγ 调控基因的表达。
 
II. Description
      ISRE-Luc RAW264.7 报告基因细胞是由 ISRE 调控并表达 Luc 荧光素 酶报告基因的 RAW264.7细胞。RAW264.7 是小鼠巨噬细胞的常用模型,用于研究细胞对微 生物及其产物的反应。RAW 264.7 衍生细胞内源性表达许多 PRR,包括 toll 样受体 (TLR)、 NOD 样受体 (NLR)、RIG-I 样受体 (RLR) 和 C 型凝集素受体 (CLR)。STING 激活的 原理见下图所示
 



Figure 1:ISRE-Luc THP-1 细胞模型原理图
 
III. Introduction
Host Cell: Raw264.7
Expressed gene: ISRE
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: DMEM+10%FBS+200ug/ml zeocin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
Application(s): Functional(Report Gene) Assay
 
IV.. Description of Host Cell Line
Organism: Mus musculus, mouse
Tissue: Abelson murine leukemia virus-induced tumor; ascites
Disease: Abelson murine leukemia virus-induced tumor
Morphology: Monocyte/macrophage
Growth Properties: Adherent
 
V. Representative Data

Figure 2. Detect Luciferase assay by Ultra Luciferase Detection Kit CBPH0001(we strongly suggest to purchase from Cobioer).  Dose Response of 2'3-cGAMP in ISRE-Luc RAW264.7.

 

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